中药复方是一复杂体系，起疗效作用的物质基础，应是广义的化学成分，包括无机物、小分子有机化合物（如挥发油、生物碱、黄酮、皂甙等）及生物大分子（如肽、蛋白、糖肽、多糖等）三大类。中药复方依赖这些化学成分，起到有主次的多靶点、有机的整体协同的治疗效果。开展中药复方物质基础和药效、作用机理相关性研究，应采用“一个结合、二个基本讲请、三个化学层次、四个药理水平”这样一整套研究体系和引进现代化学、分子生物学、信息等学科的先进技术来解决相应的方法学。“一个结合”是药理研究与化学研究相结合；“二个基本讲清”：讲清中药复方的药效化学成分，基本讲清中药复方的药效和作用机理；“三个化学层次”：药味、有效部分、有效成分；“四个药理水平”：整体动物、组织器官、细胞亚细胞、分子生物学。因此，复方化学研究应以化学-药理-中医理论相结合作为阐明药效物质基础的必要途径，以寻找中药活性组成群是药效物质基础为主要任务，以分子生物学技术为介导，借助于计算机辅助手段，揭示化学、药理和临床之间复杂多维信息的关联和定量组效关系。

 

    二、中药复方药效物质基础研究的基本方法

 

    1.以液相色谱-质谱为主，多种高效色谱联用综合分析中药复方化学组分。

 

    中药复方中含有多糖、蛋白质、有机酸、生物碱、皂甙、黄酮、挥发油等各类极性差别很大的化合物，需要用色谱分析的理论与方法，包括最佳柱系统推荐、操作条件的最优化、重叠峰的解析和定量等来解决复杂体系的分离问题。可采取以液相色谱-紫外-质谱为主流，辅以气相色谱、毛细管电泳的各种分离模式和联用技术，用气相色谱分析挥发油成分、毛细管电泳分析生物大分子；反相高效液相色谱分析中等极性和非极性成分，对一些极性较强的酸、碱类则需在流动相中加入添加剂，或用离子对色谱，形成一整套综合分析的技术和方法，并为部位、组分的分离纯化建立基础。最新的三级四极杆质谱仪灵敏度高，实现了大气压下的软电离，产生拟分子离子峰，以及选择离子检测技术，使得对未知化合物的定性定量能力大为增强。

 

    2.制备液相色谱，分离活性物质，满足结构测定、活性、毒理实验乃至于治疗等大规模应用的要求。

 

    制备液相色谱以其高分离度、快速、灵活，并能制备一定数量等特点已广泛地应用于生命科学，因此作为复方研究，在制备其药效物质的组分时，无疑是首选的方法。可在分析型液相色谱上进行操作条件优化后放大至制备色谱，考察流速、上样量及梯度洗脱条件，按保留时间（即化合物与流动相、固定相的分子间相互作用）切割组分，用冷冻干燥技术得到恒重的固体混合物提供给药理实验筛选用，并用药理实验的反馈信息继续分离活性部位和组分，进行部位和组分的优化。

 

    3.建立多途径、多靶点整合调节的生物学机制研究平台，作为中药复方活性物质筛选的靶标。

 

    实验药理学研究已从以往主要从整体水平进行药效评价逐步发展为整体、细胞及分子水平相结合的研究模式。激素、神经递质、细胞因子等活性分子及受体乃至基因表达等已被作为中药药理学研究的靶标，为中药复方药理学的深入研究积累了较为丰富的经验和可供借鉴的资料。可分别在动物、器官、细胞和基因多个途径上，用不同的中药复方（包括单味药）进行活性筛选。目前这方面工作已取得初步成效。（暨南大学医学院/赵国平 钱三旗 湖南中医药大学/何清湖）